Diagnosa Laboratorium

This form of the disease occurs in the cattle-raising regions of eastern Africa where pastoralists use areas grazed by wildebeest, and in southern Africa in areas where wildebeest and cattle are grazed together. The disease, however, can also affect a variety of other ruminant species in zoological collections world-wide and so, apart from antelope of the subfamilies Alcelaphinae and Hippotraginae, it is advisable to regard all ruminants as susceptible. Most laboratory-based tests have relied on one attenuated isolate (WC11) that has been subjected to many laboratory passages as a source of viral antigen and DNA (17). The full nucleotide sequence of the virulent low passage virus (C500) is now available and will form the basis of further studies of this virus (4).

 

 

AIHV-1 bisa ditemukan pada hewan yang menunjukan gejala klinis dengan menggunakan leukosit atau suspensi sel darah perifer yang dibuat dari kelenjar getah bening dan limpa. Virus juga dapat ditemukan pada rusa kutub, baik dari leukosit atau dari suspensi sel organ lainnya. OvHV-2 belum pernah diidentifikasi secara formal, meskipun garis sel lymphoblastoid berkembangbiak dari hewan tertular yang mengandung DNA OvHV-2-spesifik, partikel virus telah diamati dalam sel-sel ini.

 

Baik AlHV-1 maupun OvHV-2 telah menjangkiti secara eksperimen pada kelinci dan hamster, dimana lesio berkembang sebagai salah satu karakteristik dari MCF. DNA virus telah terdeteksi dalam bahan klinis dari kasus MCF yang disebabkan oleh AIHV-1 dan OvHV-2 menggunakan PCR. PCR menjadi metode pilihan untuk mendiagnosis-OvHV 2.

 

Isolasi dan deteksi virus:
• Dinginkan tetapi jangan membekukan jaringan.
• AlHV-1 tidak aktif dengan cepat pada hewan mati - sampel yang paling bermanfaat dikumpulkan dengan segera setelah eutanasia atau kematian.
• Jaringan untuk isolasi virus: darah antikoagulan 10-20 ml- dalam EDTA, limpa, paru-paru dan kelenjar getah bening,
dan kelenjar adrenal
• Jaringan untuk PCR: darah antikoagulan, ginjal, kelenjar getah bening, dinding usus, otak dan jaringan lainnya dari atas.

 

 

Histopatologi:
• Sapi: paru-paru, hati, kelenjar getah bening, kulit (jika muncul lesio), ginjal, kelenjar adrenal, mata, kerongkongan, Peyer's patches, kandung kemih, tiroid, otot jantung,
dan otak
• Bison: jaringan saluran urogenital dan usus sangat penting
• Spesies lainnya: berbagai jaringan.

 

Identifikasi agen:
• Isolasi virus dari leukosit perifer (AlHV-1).
Kebanyakan kultur monolayer yang berasal dari ruminansia bersifat rentan dan dapat terjadi efek cytopathic (CPE). Kultur darei sel tiroid sapi telah digunakan secara ekstensif. Isolat primer biasanya menghasilkan CPE multinuklear di mana antigen virus dapat
diidentifikasi oleh immunofluorescence atau immunocytochemistry.
• PCR (AlHV-1 dan OvHV-2)

 

Uji Serologi:
AlHV-1
Rusa kutub yang terinfeksi akan membentuk antibodi terhadap AIHV-1, yang dapat dideteksi dalam empat uji berikut ini. Namun, respon antibodi dari hewan yang tertular sangat terbatas, tanpa berkembangnya netralisasi antibodi, sehingga deteksi bergantung pada penggunaan immunofluorescence, ELISA atau imunoblotting.

• Virus neutralisation

• Immunoblotting

• Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

• Immunofluorescence

 

OvHV-2
Antibodi untuk OvHV-2 hanya terdeteksi dengan menggunakan AIHV-1 sebagai sumber antigen. Domba domestik secara konsisten memiliki antibodi yang dapat dideteksi oleh immunofluorescence, ELISA atau imunoblotting. Meskipun sering antibodi dapat dideteksi oleh immunofluorescence dan ELISA pada sapi dengan MCF, pada hewan tertular yang lebih akut seperti rusa, antibodi tidak selalu hadir.

• Immunofluorescence

• ELISA

• Immunoblotting